Il-problemi u s-soluzzjonijiet komuni fil-proċess tas-sinteżi tal-peptidi jinkludu l-aspetti li ġejjin:
Kontenut tal-peptidi: Il-kontenut tal-peptidi jirreferi għall-perċentwal ta' sustanzi peptidi f'kampjun relattiv għal sustanzi mhux peptidi. Fi prodotti peptidi, minbarra l-peptide innifsu, komponenti mhux tal-melħ introdotti matul il-proċess ta 'produzzjoni, bħall-ilma, solventi assorbiti, joni ta' koordinazzjoni, u melħ, huma inklużi wkoll
Stabbiltà kimika:
Reazzjoni tad-deamidation: Ir-residwi Asn/Gln huma faċilment idrolizzati biex jiffurmaw Asp/Glu.
Idroliżi: Il-bonds tal-peptidi fil-peptidi jinkisru faċilment bl-idroliżi, speċjalment dawk iffurmati mill-parteċipazzjoni ta 'Asp, speċjalment bonds ta' peptidi Asp Pro u Asp Gly.
Reazzjoni ta 'raċemizzazzjoni: Ir-residwi kollha ta' aċidu amminiku ħlief Gly għandhom atomi tal-karbonju alfa chiral u huma suxxettibbli għal reazzjoni ta 'raċemizzazzjoni taħt katalisi alkalina. Ir-residwi Asp huma l-aktar suxxettibbli għal reazzjonijiet ta 'raċemizzazzjoni.
- degradazzjoni ta 'eliminazzjoni: Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr u residwi oħra kollha jistgħu jiġu degradati permezz - eliminazzjoni, li hija aktar probabbli li sseħħ f'pH alkalin u hija affettwata mit-temperatura u l-joni tal-metall
Stabbiltà fiżika:
Denaturazzjoni, adsorbiment, aggregazzjoni jew preċipitazzjoni: Id-denaturazzjoni tal-peptidi hija ġeneralment relatata mal-qerda tal-istrutturi terzjarji u sekondarji. Fl-istat żnaturat, il-peptidi huma aktar suxxettibbli għal reazzjonijiet kimiċi u l-attività tagħhom hija diffiċli biex tirkupra. L-intermedjarju ffurmat matul il-proċess ta 'denaturazzjoni għandu solubilità baxxa u huwa suxxettibbli għall-aggregazzjoni u l-preċipitazzjoni
preservazzjoni:
L-aħjar kundizzjonijiet ta 'ħażna: Il-peptidi ġeneralment jinħażnu fil-forma ta' trab imnixxef bil-friża, li huwa stabbli ħafna fi grad -20, speċjalment wara t-tnixxif bil-friża u maħżun f'dryer ta' grad -20. Il-biċċa l-kbira tal-peptidi jistgħu jinħażnu f'din it-temperatura għal diversi snin mingħajr tibdil. Biex jitnaqqas l-impatt tal-umdità, il-peptidi mnixxfa bil-friża għandhom jiġu restawrati għat-temperatura tal-kamra taħt kundizzjonijiet niexfa qabel ma jiġu esposti għall-arja.
Ippakkjar: Hesheng Biotechnology tirrakkomanda ippakkjar żgħir biex tevita ċikli ripetuti ta 'friża u tidwib, tnaqqas in-numru ta' fetħiet u għeluq tal-kontenituri, u b'hekk tnaqqas iċ-ċansijiet ta 'immaniġġjar mhux xieraq jew kontaminazzjoni batterjali, u tiżgura l-istabbiltà tal-peptidi
Ittestjar tal-purità:
Garanzija ta 'purità: Il-peptidi kollha kkonsenjati laħqu l-purità meħtieġa, u l-peptidi li ma jissodisfawx l-istandard se jintremew. Ir-riżultati ta 'skoperta HPLC u MS jistgħu jivverifikaw il-purità u l-piż molekulari tal-peptide, filwaqt li juru l-impuritajiet ewlenin.
Metodi oħra ta' skoperta, bħall-analiżi tal-aċidu amminiku jew l-analiżi elementali, jistgħu jikkonfermaw il-kompożizzjoni tal-aċidu amminiku tal-peptidi bħala mezz supplimentari ta' konferma tal-peptidi
Teknoloġija ta' sinteżi:
Sinteżi tal-peptidi tal-fażi solida: Is-sintesi tal-peptidi tal-fażi solida ma teħtieġx purifikazzjoni ta 'prodotti intermedji, li tippermetti proċessi ta' sinteżi kontinwi u tistabbilixxi l-pedament għall-awtomazzjoni tas-sintesi tal-peptidi. Ibbażat fuq sinteżi kimika Fmoc, il-peptide fil-mira ġie sintetizzat billi torbot b'mod kovalenti l-grupp carboxyl tal-aċidu amminiku C-terminal ma 'reżina polimeru li ma jinħallx, u mbagħad jibda mill-grupp amminiku tal-aċidu amminiku
Il-kontenut ta 'hawn fuq jiġbor fil-qosor problemi u kontromiżuri komuni fis-sintesi tal-peptidi, li jkopru aspetti multipli bħall-istabbiltà kimika, l-istabbiltà fiżika, il-kundizzjonijiet tal-ħażna, l-ittestjar tal-purità, eċċ.