-
Tat-telefon
+86-0755 2308 4243
-
L-indirizz
Kamra 309, Bini Meihua, Park Industrijali Tajwan, No.2132 Songbai Road, Distrett ta' Bao'an, Shenzhen, Ċina
-
Indirizz elettroniku
FAQ
X'metodoloġiji ta' sinteżi juża Biorunstar għas-sintesi tal-peptidi?
RE: Biorunstar żviluppaw metodoloġiji differenti ta 'sinteżi ta' fażi ta 'soluzzjoni biex jissodisfaw ir-rekwiżiti tal-klijenti. Normalment, tiġi applikata l-kimika Fmoc tal-fażi solida.
Kif tibgħat il-peptidi? Liema data QC se tiġi pprovduta?
RE: Il-peptidi kollha se jintbagħtu minn DHL jew FedEx express bħal fi trab lajofilizzat f'kunjetti individwali ttikkettjati sew, f'temperatura tal-kamra. Bl-eċċezzjoni ta 'peptidi mhux raffinati, li se jiġu kkontrollati biss bl-ispettrometrija MALDI-MASS, il-peptidi purifikati sintetiċi kollha jiġu b'rapport tal-proġett (CoA), dejta MS u dejta HPLC. skedi tad-dejta se jiġu pprovduti li jkun fihom il-karatteristiċi ewlenin, bħas-sekwenza tal-peptidi, il-purità, il-kwantità, il-modifika, id-dejta tal-ispettru tal-massa u d-dejta tal-HPLC.
X'inhu l-ħin tipiku ta 'dawran għas-sintesi tal-peptidi? Kemm iddum biex tibgħatli?
RE: Il-ħin tipiku ta' tibdil tagħna huwa ta' 2-3 ġimgħat għal peptide standard taħt 30 aċidu amminiku. Il-ħin tat-tibdil ivarja skont it-tul tal-peptide, il-kwantità, is-solubilità u d-diffikultà. Tipikament 3-5 ijiem biex tilħaq riċerkaturi f'pajjiżi oħra.
Kemm inti tista 'sintetizza?
RE: Biorunstar għandu esperjenza estensiva fis-sintetizzazzjoni ta 'peptidi twal, sa 130aa. B'differenza minn bosta fornituri ta 'peptidi li huma komdi biss biex jagħmlu peptidi taħt 30 jew 40aa, Biorunstar għandu esperjenza tajba biex jagħmel peptidi li jvarjaw minn 40aa sa 90aa. Huwa diffiċli li jiġu sintetizzati peptidi twal, speċjalment 100aa jew itwal. Jekk qed tippjana li tisintetizza sekwenza ta '130aa jew itwal, jekk jogħġbok ikkuntattjana għal servizz ta' espressjoni u purifikazzjoni ta 'proteini tad-dwana.
X'jiġri jekk jinqalgħu xi problemi waqt il-proċess ta 'sinteżi jew purifikazzjoni?
RE: Kull peptide għandu l-karatteristiċi speċifiċi tiegħu. Jekk iseħħu xi problemi matul is-sinteżi lil hinn mill-aspettattiva tagħna, u ma nistgħux inwasslu l-peptide tiegħek fil-ħin, aħna ninfurmawk kemm jista 'jkun malajr. B'kumbinazzjoni li ma nkunux kapaċi nagħmlu l-peptide, ma titħallasx għall-ebda spiża.
Forma tal-melħ TFA, Aċetat jew forma tal-melħ HCl: Liema forma għandi nagħżel?
B'mod awtomatiku, il-peptidi huma sintetizzati fil-melħ TFA. Għal esperimenti relatati mal-kultura taċ-ċelluli jew tat-tessuti, għandek tikkunsidra li jkollok peptidi prodotti f'forma ta 'melħ aċetat jew HCl f'98% jew ogħla biex tevita risponsi anormali. Il-forma tal-melħ tal-aċetat jew tal-HCl tista' tintalab bi spiża addizzjonali.
X'inhi l-ħajja fuq l-ixkaffa ta 'peptide?
RE: Il-peptidi huma stabbli għal minimu ta' sena jekk jinħażnu lajofilizzati fil-friża. Jekk il-peptidi jinħall, il-ħajja fuq l-ixkaffa tista' titnaqqas. Jekk il-peptidi jkun fihom diversi aċidi amminiċi reattivi li jistgħu jiġu ossidizzati bħal Trp, Met iżda speċjalment Cys, il-ħajja fuq l-ixkaffa tista 'titnaqqas ukoll.
Il-peptide fih diversi cysteines u għalhekk jista 'faċilment jifforma rabtiet disulfide. Kif nista' nevita dan?
RE: Jekk is-sekwenza tal-peptidi fiha diversi cysteines, jew aċidi amminiċi reattivi oħra, li huma ossidizzati faċilment, Biorunstar joffri li jwassal il-peptide bi traċċi tad-DTT reduttant qawwi. Il-peptide jitwassal biss bid-DTT jekk dan huwa speċifikament permess mill-klijent.
Kif naħżen il-peptidi sintetiċi tiegħi?
RE: Il-biċċa l-kbira tal-peptidi lajofilizzati se jkunu stabbli f'temperatura ambjentali għal 2-3 ġimgħat. Għal ħażna fit-tul, għandek taħżen peptidi lajofilizzati fi -20 grad . Għandhom jiġu evitati ċikli ripetuti ta' ffriżar u tidwib. Ħallih jasal għat-temperatura tal-kamra qabel tiftaħ. Il-ħajja fuq l-ixkaffa tas-soluzzjonijiet tal-peptidi hija limitata; soluzzjoni ta' peptide ladarba tkun ippreparata għandha tintuża kemm jista' jkun malajr.
X'inhi l-purità għall-peptide mhux raffinat u l-peptide dessalted? Kif tippurifika l-peptide? X'inhuma l-impuritajiet?
RE: Għal peptidi qosra b'sekwenzi normali taħt 15aa, ġeneralment huwa 40-60% mill-HPLC għal grad mhux raffinat; 50-70% mill-HPLC għal grad imneħħi mill-melħ. Iktar ma jkun itwal il-peptide, inqas tkun il-purità għal mhux raffinat jew imneħħi mill-melħ. Il-peptidi huma ġeneralment ippurifikati mill-HPLC bl-użu tal-ilma u l-gradjent tal-acetonitrile. Il-biċċa l-kbira tal-impuritajiet huma frammenti jew peptidi ta 'tħassir, peptidi deprotetti b'mod mhux komplut, u melħ u ilma residwu.
Spjegazzjoni tal-Purità tal-Peptide permezz tal-HPLC, il-Kontenut Totali tal-Peptide u l-Kontenut tal-Peptide fil-mira.
RE: Biorunstar jibgħat peptidi skont il-piż gross tat-trab lajofilizzat. It-trab lajofilizzat jinkludi impuritajiet bħal frammenti jew peptidi ta 'tħassir, peptidi deprotetti mhux kompletament, TFA u ilma residwu. Il-Purità tal-Peptide titkejjel bl-HPLC. Huwa l-ammont ta 'peptide korrett relattiv għall-analiti kollha li jassorbu f'~214 nm (il-bond tal-peptide jassorbi), x'aktarx tħassir, truncation jew sekwenzi deprotetti mhux kompletament, eċċ. Il-purità tal-peptidi mill-HPLC ma tqisx l-ilma u l-melħ li huma normalment preżenti fil-kampjun. Kontenut totali tal-peptidi huwa l-perċentwal tal-peptidi totali preżenti relattiv għal dak kollu preżenti fit-trab tal-peptide lajofilizzat. Il-kontenut totali tal-peptidi huwa ddeterminat mill-analiżi tal-kontenut tan-nitroġenu. Il-Kontenut tal-Peptide fil-mira fit-trab tal-peptide lajofilizzat għalhekk jista 'jiġi konkluż bil-formula: Kontenut totali tal-Peptide X Purità tal-Peptide mill-HPLC.
X'inhu l-metodu tat-tikkettar tal-Fluorescein?
RE: FITC (Fluorescein isothiocyanate) huwa l-prekursur attivat użat għat-tikkettar tal-Fluorescein. Għat-tikkettar Nterminal effiċjenti, aminohexanoyl b'seba' atomi
spacer (NH2-CH2-CH2-CH2-CH{2-CH{2-COOH) jiddaħħal bejn il-fluworofor (fluoroscein) u l- N-terminal tal-peptide. Dan l-ispazjar jgħin biex jissepara l-fluworophore mill-punt tat-twaħħil tiegħu, potenzjalment inaqqas l-interazzjoni tal-fluworophore mal-bijomolekula li magħha huwa konjugat u jagħmilha aktar aċċessibbli għal reaġenti ta 'skoperta sekondarja.
spacer (NH2-CH2-CH2-CH2-CH{2-CH{2-COOH) jiddaħħal bejn il-fluworofor (fluoroscein) u l- N-terminal tal-peptide. Dan l-ispazjar jgħin biex jissepara l-fluworophore mill-punt tat-twaħħil tiegħu, potenzjalment inaqqas l-interazzjoni tal-fluworophore mal-bijomolekula li magħha huwa konjugat u jagħmilha aktar aċċessibbli għal reaġenti ta 'skoperta sekondarja.
It-tikkettar C-terminal tal-Bijotin (jew FITC) huwa possibbli?
RE: Iva. L-ittikkettjar C-terminal ta 'Bijotin (jew FITC) isir biż-żieda ta' residwu ta 'Lisina fit-tmiem C ta' peptide, u Biotin (jew FITC) huwa mwaħħal mal-katina tal-ġenb Lysine permezz ta 'bond amide. It-tagħbija pożittiva tal-lisina titneħħa.
X'inhu t-tul xieraq tal-peptide għall-produzzjoni tal-antikorpi?
RE: Ġeneralment, peptide residwu 10-25 huwa rakkomandat. Peptide itwal jista' jkollu aktar epitopi, iżda jista' jkollu wkoll ċans akbar li jifforma strutturi sekondarji stabbli li mhumiex forom indiġeni. Peptide iqsar (<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.
X'inhi MAPP?
RE: MAPS jew Multi-Antigenic Peptide huwa peptide ramifikat li fih il-ktajjen lineari tal-peptidi huma marbuta fit-tmiem C tagħhom permezz tal-qalba tal-polilisina, u b'hekk iżidu d-daqs tal-molekula sħiħa. Dan isir biex jiġi eliminat l-akkoppjar ta 'peptidi ma' KLH. Jidher li, madankollu, il-konformazzjoni tal-peptidi fuq MAP hija inqas flessibbli, u l-antikorpi miksuba mill-MAP tipikament jirrikonoxxu l-proteina fil-mira inqas spiss milli bil-konjugazzjoni KLH konvenzjonali. Barra minn hekk, m'hemm l-ebda peptide ħieles prodott meta tagħmel MAPS, li jagħmilha diffiċli biex jitneħħew l-antikorpi diretti tal-qalba tal-polylysine. Il-purifikazzjoni tal-MAPS permezz tal-HPLC hija diffiċli, u l-MAPS hija pprovduta mingħajr verifika tal-massa minħabba l-eteroġeneità tagħha u d-daqs molekulari kbir.
Għaliex is-soluzzjoni tiegħi tal-peptide konjugat KLH tidher imċajpra?
RE: KLH jew Keyhole Limpet Hemocyanin hija proteina aggregating kbira (MW=4x105 - 1x107). Minħabba d-daqs u l-istruttura tiegħu, is-solubilità tiegħu fl-ilma hija limitata, u tikkawża dehra mċajpra. Dan m'għandux jaffettwa l-immunoġeniċità u s-soluzzjoni mdardra tista' tintuża għat-tilqim.
Tista' tispjega l-qċaċet tal-massa M+Na u M+K fl-ispettri MALDI?
RE: Huwa komuni ħafna li tara adducts Na (sodju) u K (potassju) fl-ispettru MALDI. Is-sodju u l-potassju jiġu mill-ilma użat fis-solventi tal-peptidi. Anke ilma distillat u dejonizzat għandu traċċi ta 'jonji tas-sodju u tal-potassju, li qatt ma jistgħu jitneħħew għal kollox. Dawn isiru jonizzati matul il-proċess ta 'speċifikazzjoni tal-massa MALDI u jorbtu mal-gruppi karbossili ħielsa tal-peptide. Minħabba li m'hemm l-ebda sistema ta 'purifikazzjoni tal-ilma li tneħħi kull jone tas-sodju jew tal-potassju mill-ilma, li tara l-adducts tas-sodju u tal-potassju f'ħinijiet hija komuni ħafna u inevitabbli fl-ispeċifikazzjoni tal-massa MALDI. Din mhix indikazzjoni li l-peptide mhuwiex pur, u lanqas m'għandux jiġi konfuż ma 'piż molekulari mhux korrett.